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Un &#225;mbito de la investigaci&#243;n que se est&#225; expandiendo con rapidez son los m&#233;todos que permiten identificar bacterias&#44; virus y hongos en los pulmones de pacientes con FQ y bronquiectasias sin necesidad de cultivo&#46; Las plataformas de secuenciaci&#243;n de alto rendimiento dirigidas a regiones conservadas del ADN&#44; como el gen bacteriano ARNr 16S&#44; permiten identificar sin necesidad de cultivo microbiano bacterias presentes en el esputo&#44; el lavado broncoalveolar &#40;LBA&#41; o el frotis de v&#237;as a&#233;reas superiores<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46; Es posible identificar con mayor sensibilidad pat&#243;genos potenciales&#44; identificar bacterias no cultivables&#44; conocer los &#171;fenotipos&#187; de la enfermedad bas&#225;ndose en los perfiles de microbiota y comprender mejor los efectos del tratamiento sobre los microorganismos y sobre la respuesta del hu&#233;sped&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La FQ es quiz&#225;s la enfermedad en la que el microbioma pulmonar se ha estudiado con mayor intensidad&#46; Los &#250;ltimos datos han mostrado que el microbioma de las v&#237;as a&#233;reas superiores comienza a modificarse durante el primer a&#241;o de vida con sobrecrecimiento de <span class="elsevierStyleItalic">Staphylococcus</span>&#44; incluso en los ni&#241;os que no reciben tratamiento antibi&#243;tico<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">4&#44;5</span></a>&#46; A medida que la enfermedad avanza&#44; aumenta la abundancia relativa de las proteobacterias al aparecer los pat&#243;genos &#171;tradicionales&#187; de la FQ&#44; tales como especies de <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomona</span> spp&#46; En estudios longitudinales se ha observado que&#44; con el paso del tiempo&#44; la microbiota pulmonar permanece estable&#44; al menos a corto plazo&#44; y no var&#237;a de forma considerable durante las exacerbaciones<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; Uno de los estudios m&#225;s extensos efectuados hasta la fecha en pacientes con FQ &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>269&#41; confirm&#243; los patrones de diversidad microbi&#243;tica observados en otros estudios a peque&#241;a escala&#44; que hab&#237;an indicado asociaciones entre la disbiosis &#40;reducci&#243;n de la diversidad de la microbiota con dominancia de uno o unos pocos g&#233;neros&#41; y la mayor gravedad de la enfermedad&#44; la edad y el mayor uso de antibi&#243;ticos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46; El n&#250;cleo de la microbiota de los pacientes con FQ parece estar formado por un subgrupo de g&#233;neros&#44; que comprende <span class="elsevierStyleItalic">Veillonella&#44; Burkholderia&#44; Prevotella&#44; Streptococcus&#44; Rothia</span> y <span class="elsevierStyleItalic">Actinomyces</span>&#44; mientras que otros g&#233;neros&#44; como las <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomonas</span> o los <span class="elsevierStyleItalic">Staphylococcus</span>&#44; son m&#225;s dominantes a medida que la enfermedad avanza&#46; En muy pocos estudios se ha realizado un seguimiento longitudinal prolongado de los pacientes o se han recabado datos sobre el impacto de los tratamientos con antibi&#243;ticos inhalados o con moduladores del CFTR&#44; por lo que ser&#225; necesario abordar estos aspectos antes de que la utilidad de los datos sobre la microbiota en la pr&#225;ctica cl&#237;nica est&#233; bien consolidada&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En las bronquiectasias&#44; la microbiota se ha estudiado menos que en la FQ&#46; Estudios a peque&#241;a escala han mostrado su diversidad y relativa estabilidad temporal&#44; y han identificado una disminuci&#243;n de la diversidad durante las exacerbaciones que tambi&#233;n se asocia con mayor gravedad de la enfermedad<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>&#46; Algunos g&#233;neros frecuentes&#44; como <span class="elsevierStyleItalic">Veillonella&#44; Streptococcus</span> y <span class="elsevierStyleItalic">Prevotella</span>&#44; los comparte con la FQ&#44; con predominio de <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomona</span> o <span class="elsevierStyleItalic">Haemophilus</span>&#44; que se asocian con mayor gravedad de la enfermedad<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; Los resultados de un ensayo controlado aleatorizado &#40;ECA&#41; de eritromicina sugirieron que el tratamiento de larga duraci&#243;n con macr&#243;lidos&#44; una estrategia terap&#233;utica com&#250;n&#44; puede asociarse con mayor abundancia relativa de especies de <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomona</span> spp<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; Esto es importante porque es conocido que la infecci&#243;n por <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomona aeruginosa</span> se asocia con malos resultados cl&#237;nicos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46; El predominio de especies de <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomona</span> spp&#46; en la secuenciaci&#243;n tambi&#233;n se ha relacionado con un mayor n&#250;mero de exacerbaciones y mayor inflamaci&#243;n&#44; con aumento de los niveles de metaloproteinasas de matriz&#44; por ejemplo<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">9&#44;11</span></a>&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Aunque cada vez se publican m&#225;s estudios relativos a la microbiota en las bronquiectasias&#44; un porcentaje significativo de publicaciones se refieren a un &#250;nico ECA que se llev&#243; a cabo en Australia y en el que solo se incluy&#243; a pacientes que hubiesen presentado 2 o m&#225;s exacerbaciones durante el a&#241;o anterior&#44; entre otros criterios de exclusi&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; Se ha observado&#44; que en la vida real&#44; el 52-93&#37; de los pacientes con bronquiectasias no son elegibles para los ECA<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0135"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#46; Son necesarios estudios m&#225;s amplios y en poblaciones diversas&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los estudios han mostrado que los perfiles individuales de microbiota var&#237;an notablemente de una persona a otra&#46; Lo que es normal para un paciente con enfermedad estable puede no serlo para otro&#46; La clave para poder utilizar los datos de microbiota en la pr&#225;ctica cl&#237;nica ser&#225; un mayor conocimiento de los cambios que ocurren con el paso del tiempo en la microbiota de cada paciente&#44; y de las asociaciones de estos cambios con los perfiles inflamatorios pulmonares alterados y con los fenotipos y los resultados cl&#237;nicos&#46; Desde el punto de vista cl&#237;nico&#44; este cambio hacia la disbiosis&#44; junto con los cambios en los perfiles cl&#237;nicos e inflamatorios&#44; parece importante y &#250;til para estratificar a los pacientes&#44; tanto en la FQ como en las bronquiectasias&#46; Ahora es necesario determinar si es posible a&#241;adir los perfiles de microbiota a los m&#233;todos de estratificaci&#243;n&#44; como el &#237;ndice de gravedad de las bronquiectasias&#44; para obtener una predicci&#243;n adicional de las exacerbaciones o de la respuesta terap&#233;utica<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">13&#44;14</span></a>&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la pr&#225;ctica&#44; la implantaci&#243;n efectiva de los datos de microbiota est&#225; limitada por la inexistencia de un enfoque t&#233;cnico consensuado&#46; Las t&#233;cnicas de extracci&#243;n de muestras y los m&#233;todos de extracci&#243;n del ADN var&#237;an considerablemente&#46; Se han secuenciado diferentes regiones del gen ARNr 16S y existen numerosos an&#225;lisis de secuencias en fase de desarrollo&#46; Todas estas t&#233;cnicas pueden dar lugar a ligeras variaciones en las proporciones de los g&#233;neros identificados&#46; Si no se identifica y se soluciona&#44; la contaminaci&#243;n de las muestras o de los reactivos de laboratorio puede producir resultados err&#243;neos&#44; en particular en las muestras con poca biomasa&#46; Si se pretende que los datos sobre la microbiota sean &#250;tiles en la atenci&#243;n cl&#237;nica se deben solucionar estos problemas t&#233;cnicos y bioinform&#225;ticos y estandarizar los m&#233;todos&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por s&#237; sola&#44; la microbiota bacteriana no explicar&#225; la diversidad fenot&#237;pica observada en los pacientes con FQ y con bronquiectasias&#46; Los virus&#44; hongos y micobacterias tambi&#233;n forman parte del microbioma del pulm&#243;n sano y del pulm&#243;n de los pacientes con FQ y con enfermedad bronquiect&#225;sica estabilizada o exacerbada&#46; Hasta la fecha no se ha publicado ning&#250;n estudio sobre el &#171;viroma&#187; o la &#171;microbiota&#187; en las bronquiectasias&#44; a pesar del reconocimiento del problema creciente que suponen las micosis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a>&#46; Los usos terap&#233;utico y profil&#225;ctico de antibi&#243;ticos son pilares b&#225;sicos del arsenal terap&#233;utico de la FQ y de las bronquiectasias&#44; y aunque los tratamientos pueden mejorar la sintomatolog&#237;a de la enfermedad se desconoce su efecto sobre los hongos&#44; bacterias y virus que residen en la v&#237;a a&#233;rea&#46; Un mayor conocimiento del posible efecto del uso de antibi&#243;ticos sobre el desarrollo de un microbioma disbi&#243;tico en las bronquiectasias y la FQ podr&#237;a contribuir a mejorar el uso de antibi&#243;ticos en la enfermedad inicial con el fin de retrasar la aparici&#243;n de disbiosis y resistencias a f&#225;rmacos&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las tecnolog&#237;as de secuenciaci&#243;n microbiana son una poderosa herramienta para conocer estas enfermedades como nunca se han conocido antes&#46; Sin embargo&#44; por s&#237; misma&#44; la aplicaci&#243;n de instrumentos novedosos no es una finalidad&#46; La comunidad de investigadores pulmonares se enfrenta ahora al desaf&#237;o de aplicar esta tecnolog&#237;a para responder a cuestiones cl&#237;nicamente importantes y permitir que la ciencia del microbioma tenga un efecto importante sobre la atenci&#243;n de los pacientes&#46;</p></span>"
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Journal Information
Vol. 53. Issue 9.
Pages 471-472 (September 2017)
Vol. 53. Issue 9.
Pages 471-472 (September 2017)
Editorial
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Disbiosis microbiana en las bronquiectasias y la fibrosis quística
Microbial Dysbiosis in Bronchiectasis and Cystic Fibrosis
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Alison J. Dicker, James D. Chalmers
Corresponding author
jchalmers@dundee.ac.uk

Autor para correspondencia.
Scottish Centre for Respiratory Research, University of Dundee, Ninewells Hospital & Medical School, Dundee, Reino Unido
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Identificar y tratar las infecciones bacterianas es un punto fundamental del manejo de las bronquiectasias, tanto si están causadas por fibrosis quística (FQ) como por otras enfermedades subyacentes1. Es conocido que la fisiopatología de estas enfermedades entraña un círculo vicioso de infección, inflamación y daño tisular que intentamos romper con la erradicación o supresión de las bacterias patógenas con antibióticos inhalados, orales o intravenosos1,2.

Sin embargo, los avances en microbiología y genómica molecular están cambiando nuestros conocimientos sobre la fisiopatología de esta enfermedad. Un ámbito de la investigación que se está expandiendo con rapidez son los métodos que permiten identificar bacterias, virus y hongos en los pulmones de pacientes con FQ y bronquiectasias sin necesidad de cultivo. Las plataformas de secuenciación de alto rendimiento dirigidas a regiones conservadas del ADN, como el gen bacteriano ARNr 16S, permiten identificar sin necesidad de cultivo microbiano bacterias presentes en el esputo, el lavado broncoalveolar (LBA) o el frotis de vías aéreas superiores3. Es posible identificar con mayor sensibilidad patógenos potenciales, identificar bacterias no cultivables, conocer los «fenotipos» de la enfermedad basándose en los perfiles de microbiota y comprender mejor los efectos del tratamiento sobre los microorganismos y sobre la respuesta del huésped.

La FQ es quizás la enfermedad en la que el microbioma pulmonar se ha estudiado con mayor intensidad. Los últimos datos han mostrado que el microbioma de las vías aéreas superiores comienza a modificarse durante el primer año de vida con sobrecrecimiento de Staphylococcus, incluso en los niños que no reciben tratamiento antibiótico4,5. A medida que la enfermedad avanza, aumenta la abundancia relativa de las proteobacterias al aparecer los patógenos «tradicionales» de la FQ, tales como especies de Pseudomona spp. En estudios longitudinales se ha observado que, con el paso del tiempo, la microbiota pulmonar permanece estable, al menos a corto plazo, y no varía de forma considerable durante las exacerbaciones6. Uno de los estudios más extensos efectuados hasta la fecha en pacientes con FQ (n=269) confirmó los patrones de diversidad microbiótica observados en otros estudios a pequeña escala, que habían indicado asociaciones entre la disbiosis (reducción de la diversidad de la microbiota con dominancia de uno o unos pocos géneros) y la mayor gravedad de la enfermedad, la edad y el mayor uso de antibióticos7. El núcleo de la microbiota de los pacientes con FQ parece estar formado por un subgrupo de géneros, que comprende Veillonella, Burkholderia, Prevotella, Streptococcus, Rothia y Actinomyces, mientras que otros géneros, como las Pseudomonas o los Staphylococcus, son más dominantes a medida que la enfermedad avanza. En muy pocos estudios se ha realizado un seguimiento longitudinal prolongado de los pacientes o se han recabado datos sobre el impacto de los tratamientos con antibióticos inhalados o con moduladores del CFTR, por lo que será necesario abordar estos aspectos antes de que la utilidad de los datos sobre la microbiota en la práctica clínica esté bien consolidada.

En las bronquiectasias, la microbiota se ha estudiado menos que en la FQ. Estudios a pequeña escala han mostrado su diversidad y relativa estabilidad temporal, y han identificado una disminución de la diversidad durante las exacerbaciones que también se asocia con mayor gravedad de la enfermedad8. Algunos géneros frecuentes, como Veillonella, Streptococcus y Prevotella, los comparte con la FQ, con predominio de Pseudomona o Haemophilus, que se asocian con mayor gravedad de la enfermedad9. Los resultados de un ensayo controlado aleatorizado (ECA) de eritromicina sugirieron que el tratamiento de larga duración con macrólidos, una estrategia terapéutica común, puede asociarse con mayor abundancia relativa de especies de Pseudomona spp9. Esto es importante porque es conocido que la infección por Pseudomona aeruginosa se asocia con malos resultados clínicos10. El predominio de especies de Pseudomona spp. en la secuenciación también se ha relacionado con un mayor número de exacerbaciones y mayor inflamación, con aumento de los niveles de metaloproteinasas de matriz, por ejemplo9,11.

Aunque cada vez se publican más estudios relativos a la microbiota en las bronquiectasias, un porcentaje significativo de publicaciones se refieren a un único ECA que se llevó a cabo en Australia y en el que solo se incluyó a pacientes que hubiesen presentado 2 o más exacerbaciones durante el año anterior, entre otros criterios de exclusión9. Se ha observado, que en la vida real, el 52-93% de los pacientes con bronquiectasias no son elegibles para los ECA12. Son necesarios estudios más amplios y en poblaciones diversas.

Los estudios han mostrado que los perfiles individuales de microbiota varían notablemente de una persona a otra. Lo que es normal para un paciente con enfermedad estable puede no serlo para otro. La clave para poder utilizar los datos de microbiota en la práctica clínica será un mayor conocimiento de los cambios que ocurren con el paso del tiempo en la microbiota de cada paciente, y de las asociaciones de estos cambios con los perfiles inflamatorios pulmonares alterados y con los fenotipos y los resultados clínicos. Desde el punto de vista clínico, este cambio hacia la disbiosis, junto con los cambios en los perfiles clínicos e inflamatorios, parece importante y útil para estratificar a los pacientes, tanto en la FQ como en las bronquiectasias. Ahora es necesario determinar si es posible añadir los perfiles de microbiota a los métodos de estratificación, como el índice de gravedad de las bronquiectasias, para obtener una predicción adicional de las exacerbaciones o de la respuesta terapéutica13,14.

En la práctica, la implantación efectiva de los datos de microbiota está limitada por la inexistencia de un enfoque técnico consensuado. Las técnicas de extracción de muestras y los métodos de extracción del ADN varían considerablemente. Se han secuenciado diferentes regiones del gen ARNr 16S y existen numerosos análisis de secuencias en fase de desarrollo. Todas estas técnicas pueden dar lugar a ligeras variaciones en las proporciones de los géneros identificados. Si no se identifica y se soluciona, la contaminación de las muestras o de los reactivos de laboratorio puede producir resultados erróneos, en particular en las muestras con poca biomasa. Si se pretende que los datos sobre la microbiota sean útiles en la atención clínica se deben solucionar estos problemas técnicos y bioinformáticos y estandarizar los métodos.

Por sí sola, la microbiota bacteriana no explicará la diversidad fenotípica observada en los pacientes con FQ y con bronquiectasias. Los virus, hongos y micobacterias también forman parte del microbioma del pulmón sano y del pulmón de los pacientes con FQ y con enfermedad bronquiectásica estabilizada o exacerbada. Hasta la fecha no se ha publicado ningún estudio sobre el «viroma» o la «microbiota» en las bronquiectasias, a pesar del reconocimiento del problema creciente que suponen las micosis15. Los usos terapéutico y profiláctico de antibióticos son pilares básicos del arsenal terapéutico de la FQ y de las bronquiectasias, y aunque los tratamientos pueden mejorar la sintomatología de la enfermedad se desconoce su efecto sobre los hongos, bacterias y virus que residen en la vía aérea. Un mayor conocimiento del posible efecto del uso de antibióticos sobre el desarrollo de un microbioma disbiótico en las bronquiectasias y la FQ podría contribuir a mejorar el uso de antibióticos en la enfermedad inicial con el fin de retrasar la aparición de disbiosis y resistencias a fármacos.

Las tecnologías de secuenciación microbiana son una poderosa herramienta para conocer estas enfermedades como nunca se han conocido antes. Sin embargo, por sí misma, la aplicación de instrumentos novedosos no es una finalidad. La comunidad de investigadores pulmonares se enfrenta ahora al desafío de aplicar esta tecnología para responder a cuestiones clínicamente importantes y permitir que la ciencia del microbioma tenga un efecto importante sobre la atención de los pacientes.

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