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    "textoCompleto" => "<span class="elsevierStyleSections"><p id="par0005" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Durante la &#250;ltima d&#233;cada&#44; el tratamiento del c&#225;ncer de pulm&#243;n&#44; y en especial el del c&#225;ncer de pulm&#243;n no microc&#237;tico &#40;CPNM&#41;&#44; se ha modificado con el desarrollo de nuevas intervenciones dirigidas a mutaciones detectadas en muestras patol&#243;gicas de CPNM<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a>&#46; Algunos de los genes que pueden analizarse son&#44; entre otros&#44; el receptor del factor de crecimiento epid&#233;rmico <span class="elsevierStyleItalic">&#40;EGFR&#41;</span>&#44; la cinasa del linfoma anapl&#225;sico <span class="elsevierStyleItalic">&#40;ALK&#41;</span> o el proto-<span class="elsevierStyleItalic">oncog&#233;n ROS1</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La punci&#243;n-aspiraci&#243;n transbronquial &#40;PATB&#41; guiada por ultrasonograf&#237;a endobronquial &#40;USEB&#41; es una t&#233;cnica m&#237;nimamente invasiva y de alto rendimiento diagn&#243;stico&#44; especialmente en lesiones de la v&#237;a a&#233;rea central&#46; Es una t&#233;cnica segura&#44; y la Sociedad Respiratoria Europea &#40;<span class="elsevierStyleItalic">European Respiratory Society</span> &#91;ERS&#93;&#41;&#44; la Sociedad Tor&#225;cica Europea &#40;<span class="elsevierStyleItalic">European Thoracic Society</span> &#91;ETS&#93;&#41;&#44; la Sociedad Europea de Oncolog&#237;a M&#233;dica &#40;<span class="elsevierStyleItalic">European Society of Medical Oncology</span> &#91;ESMO&#93;&#41; y el Colegio Americano de Medicina Tor&#225;cica &#40;<span class="elsevierStyleItalic">American College of Chest Physician</span> &#91;ACCP&#93;&#41; han apuntado que se emplee este abordaje para el diagn&#243;stico inicial y estadificaci&#243;n del c&#225;ncer de pulm&#243;n&#44; especialmente el CPNM<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;4</span></a>&#46; El objetivo de este estudio fue identificar la presencia de 3 alteraciones gen&#233;ticas que se pueden tratar mediante los inhibidores terap&#233;uticos espec&#237;ficos de <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> y <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#44; en muestras obtenidas mediante PATB guiada por USEB&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Entre julio de 2014 y junio de 2015 llevamos a cabo un estudio prospectivo y descriptivo de muestras de PATB guiada por USEB de un centro de referencia de Chile&#46; Todos los pacientes firmaron el documento de consentimiento&#44; y el comit&#233; de &#233;tica de nuestro centro aprob&#243; el protocolo&#46; Los criterios de inclusi&#243;n fueron los siguientes&#58; a&#41;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>paciente adulto &#40;&#62;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>a&#241;os&#41; con lesi&#243;n compatible con c&#225;ncer de pulm&#243;n en los estudios cl&#237;nicos y radiol&#243;gicos y sometido a PATB guiada por USEB &#40;EBUS Olympus<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> y EBUS Fuji<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#41;&#44; y b&#41;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>c&#225;ncer de pulm&#243;n confirmado mediante examen anatomopatol&#243;gico &#40;adenocarcinoma o c&#225;ncer no especificado&#41;&#46; Si la TAC hab&#237;a mostrado adenopat&#237;as de m&#225;s de 10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm&#44; lesiones pulmonares perif&#233;ricas de 30<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm o m&#225;s o cualquier lesi&#243;n pulmonar central&#44; se practic&#243; una USEB mediast&#237;nica al paciente&#46; En el momento de practicar la USEB no se dispon&#237;a de ex&#225;menes PET de todos los pacientes&#46; No se excluy&#243; a los pacientes con enfermedad diseminada &#40;USEB practicada con finalidades diagn&#243;sticas&#41;&#44; pero s&#237; a los menores de 18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>a&#241;os y a los que no otorgaron su consentimiento para someterse al procedimiento&#46; Durante la PATB guiada por USEB se obtuvo un m&#237;nimo de 4 muestras&#46; Con las muestras citol&#243;gicas se prepararon bloques celulares y se fijaron con una soluci&#243;n de formol al 10&#37;&#46; Todas las muestras se cubrieron con una soluci&#243;n de parafina y se ti&#241;eron con hematoxilina-eosina&#46; En los casos en los que la morfolog&#237;a de adenocarcinoma o de carcinoma escamoso no era clara&#44; se practicaron tinciones inmunohistoqu&#237;micas&#44; como TTF-1&#47;napsina-A&#44; CK 5&#47;6 o p40&#46; Se efectuaron pruebas moleculares secuenciales de la mutaci&#243;n en el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en las muestras mediante las t&#233;cnicas de secuenciaci&#243;n Sanger &#40;si el recuento de c&#233;lulas tumorales era superior a un 30&#37;&#41; o Cobas<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4800 &#40;una t&#233;cnica automatizada m&#225;s cara&#44; que requiere menos ADN tumoral y ofrece resultados m&#225;s r&#225;pidos&#41;&#44; dependiendo del volumen de la muestra&#46; En los casos de negatividad de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> se analiz&#243; la presencia de la translocaci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> mediante hibridaci&#243;n fluorescente <span class="elsevierStyleItalic">in situ</span> &#40;FISH&#41; &#40;ZytoLight<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> SPEC ALK&#47;EML4 TriCheck&#8482; Probe&#41;&#46; Finalmente&#44; para la detecci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span> se efectu&#243; una tercera prueba molecular mediante FISH &#40;ZytoLight<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> SPEC ROS1 Dual Color Break Apart Probe&#41;&#46; El objetivo principal fue determinar si las muestras de tejido obtenidas a partir de la USEB eran suficientes para realizar an&#225;lisis molecular&#46; Definimos la suficiencia de la muestra como la m&#237;nima concentraci&#243;n de tumor obtenida mediante PATB guiada por USEB con la que es posible procesar una mutaci&#243;n &#40;porcentaje m&#237;nimo del alelo mutado de un 25&#37; por el m&#233;todo Sanger&#41;&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el estudio participaron 86 pacientes y se practicaron 216 PATB guiadas por USEB&#46; Cuarenta y siete &#40;54&#44;65&#37;&#41; de los 86 participantes eran mujeres&#44; y la edad media de los pacientes fue de 65&#44;70<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>a&#241;os &#40;rango 37-91&#41; y no hubo ninguna complicaci&#243;n&#46; Se obtuvieron muestras de adenopat&#237;as de 60&#47;86 &#40;69&#44;76&#37;&#41; pacientes y muestras de par&#233;nquima pulmonar de 26&#47;86 &#40;30&#44;24&#37;&#41;&#46; La cantidad de tejido fue suficiente en el 97&#44;67&#37; &#40;84&#47;86&#41; de las muestras para el an&#225;lisis de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span>&#44; en un 94&#44;23&#37; &#40;49&#47;52 muestras&#41; para el an&#225;lisis de la translocaci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> y en un 83&#44;33&#37; &#40;10&#47;12 muestras&#41; para el an&#225;lisis de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las pruebas moleculares fueron positivas en el 30&#44;23&#37; de los casos &#40;26&#47;86 muestras&#41;&#44; siendo la mutaci&#243;n m&#225;s frecuente la del <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span>&#44; presente en 22&#47;86 &#40;25&#44;58&#37;&#41;&#44; seguida de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#44; que se observ&#243; en 1&#47;12 casos &#40;8&#44;3&#37;&#41; y la mutaci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span>&#44; observada en 3&#47;52 casos &#40;5&#44;76&#37;&#41;&#46; En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a> se presenta un resumen de los resultados&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El perfil gen&#233;tico del <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> mostr&#243; que la mutaci&#243;n m&#225;s frecuente era una deleci&#243;n en el ex&#243;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>19 &#40;13 casos de delE746-A750 y 2 de del2235-2249&#41;&#44; seguida de la sustituci&#243;n del amino&#225;cido L858R en el ex&#243;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>21 &#40;4 casos&#41; y la sustituci&#243;n del amino&#225;cido G719A en la posici&#243;n 719 del ex&#243;n 18 &#40;2 casos&#41;&#46; Finalmente&#44; en un paciente se identific&#243; una mutaci&#243;n de resistencia adquirida a los inhibidores de la tirosina cinasa &#40;ITC&#41; T790M en el ex&#243;n 20&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este estudio es el primero que ha evaluado la eficacia de la PATB guiada por USEB en el c&#225;ncer de pulm&#243;n y las pruebas de mutaci&#243;n en Sudam&#233;rica&#46; Los resultados previos se hab&#237;an obtenido de muestras posquir&#250;rgicas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La PATB guiada por USEB es un m&#233;todo seguro y de alto rendimiento diagn&#243;stico en el c&#225;ncer de pulm&#243;n&#46; En un ensayo controlado aleatorizado se compar&#243; la estadificaci&#243;n mediast&#237;nica mediante este m&#233;todo con el procedimiento habitual&#44; que consiste en estudios de imagen y biopsia quir&#250;rgica&#46; El tiempo hasta la &#171;confirmaci&#243;n&#187; del diagn&#243;stico fue de 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>semanas con el nuevo abordaje&#44; frente a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>semanas con el procedimiento habitual<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; Asimismo&#44; el n&#250;mero de complicaciones fue inferior y el an&#225;lisis econ&#243;mico m&#225;s favorable en el grupo sometido a PATB guiada por USEB&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Varios estudios han evaluado la eficacia de este m&#233;todo diagn&#243;stico en los an&#225;lisis moleculares del c&#225;ncer de pulm&#243;n&#46; En un estudio multic&#233;ntrico en el que participaron 774 pacientes fue posible analizar el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en un 90&#37; de los pacientes examinados<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a>&#44; lo que concuerda con la prevalencia descrita en nuestra serie&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En otro estudio reciente llevado a cabo por Casadio et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> se practicaron PATB guiadas por USEB a 306 pacientes consecutivos con c&#225;ncer de pulm&#243;n en estadios TNM<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>IIIB-IV&#46; Se analiz&#243; el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en 195 pacientes&#44; obteni&#233;ndose el diagn&#243;stico citol&#243;gico en el 95&#44;1&#37; de los casos&#46; Se observ&#243; mutaci&#243;n en el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en un 16&#44;9&#37;&#44; en <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> en un 3&#44;9&#37; y en <span class="elsevierStyleItalic">KRAS</span> en un 31&#44;6&#37;&#46; Adem&#225;s&#44; para comparar los porcentajes de mutaciones con una serie quir&#250;rgica hist&#243;rica&#44; se efectu&#243; una prueba de la chi-cuadrado&#44; sin que se observaran diferencias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#44; lo que concuerda con la prevalencia descrita en nuestra serie&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El perfil gen&#233;tico fue similar a los que se han comunicado en otros pa&#237;ses de Sudam&#233;rica&#46; De Melo et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> analizaron los perfiles de mutaciones de 125 pacientes con adenocarcinoma pulmonar y observaron mutaciones en <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en un 21&#44;6&#37;&#44; en <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> en un 4&#44;8&#37; y en <span class="elsevierStyleItalic">KRAS</span> en un 26&#44;4&#37; de los casos&#46; Nuestro estudio es uno de los pocos que han mostrado la utilidad de la PATB guiada por USEB para identificar la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span> y la mutaci&#243;n de resistencia a ITC&#46;</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El estudio tuvo algunas limitaciones&#44; puesto que no comparamos los resultados negativos de la USEB con los resultados de la cirug&#237;a o la respuesta al tratamiento molecular&#46; En nuestro centro&#44; cada a&#241;o practicamos una media de 220 procedimientos de PATB guiada por USEB&#44; y diagnosticamos adenocarcinoma pulmonar en aproximadamente un 70&#37; de los casos&#46; Al ser un centro de referencia regional para la pr&#225;ctica de esta t&#233;cnica no realizamos el seguimiento de algunos pacientes&#44; y se completa el procesamiento de las muestras en el centro que los deriv&#243;&#44; y este es el motivo del bajo n&#250;mero de pacientes a los que practicamos an&#225;lisis de mutaci&#243;n&#46; Debido a que efectuamos pocas pruebas de <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#44; es necesario realizar un estudio con m&#225;s casos que permita un an&#225;lisis m&#225;s completo&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para concluir&#44; la PATB guiada por USEB es una t&#233;cnica m&#237;nimamente invasiva &#250;til para la obtenci&#243;n de muestras citopatol&#243;gicas destinadas al an&#225;lisis de mutaciones moleculares en pacientes con c&#225;ncer de pulm&#243;n&#46; Estas muestras tambi&#233;n se pueden utilizar para evaluar mutaciones de resistencia adquirida&#46;</p></span>"
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                  \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head  " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">EGFR&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">ALK&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">ROS1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Muestras totales&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">86&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">52&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">12&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Muestras suficientes&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">84 &#40;97&#44;67&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">49 &#40;94&#44;23&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">10 &#40;83&#44;33&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Pruebas positivas&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">22&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Porcentaje de pruebas positivas&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">25&#44;58&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">5&#44;8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">8&#44;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></tbody></table>
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Análisis moleculares de EGFR, mutación de resistencia al EGFR, ALK y ROS1 en muestras obtenidas mediante PATB-USEB en Chile
Molecular Testing of EGFR, EGFR Resistance Mutation, ALK and ROS1 Achieved by EBUS-TBNA in Chile
Sebastián Fernandez-Bussya,
Corresponding author
sfernandezbussy@alemana.cl

Autor para correspondencia.
, Gonzalo Labarcab, Yumay Piresc, Iván Caviedesd, Mauricio Burottoe
a Unidad de Neumología Intervencionista, Clínica Alemana Universidad del Desarrollo, Santiago, Chile
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c Servicio de Anatomía Patológica, Clínica Alemana Universidad del Desarrollo, Santiago, Chile
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guiada por ultrasonograf&#237;a endobronquial &#40;USEB&#41; es una t&#233;cnica m&#237;nimamente invasiva y de alto rendimiento diagn&#243;stico&#44; especialmente en lesiones de la v&#237;a a&#233;rea central&#46; Es una t&#233;cnica segura&#44; y la Sociedad Respiratoria Europea &#40;<span class="elsevierStyleItalic">European Respiratory Society</span> &#91;ERS&#93;&#41;&#44; la Sociedad Tor&#225;cica Europea &#40;<span class="elsevierStyleItalic">European Thoracic Society</span> &#91;ETS&#93;&#41;&#44; la Sociedad Europea de Oncolog&#237;a M&#233;dica &#40;<span class="elsevierStyleItalic">European Society of Medical Oncology</span> &#91;ESMO&#93;&#41; y el Colegio Americano de Medicina Tor&#225;cica &#40;<span class="elsevierStyleItalic">American College of Chest Physician</span> &#91;ACCP&#93;&#41; han apuntado que se emplee este abordaje para el diagn&#243;stico inicial y estadificaci&#243;n del c&#225;ncer de pulm&#243;n&#44; especialmente el CPNM<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;4</span></a>&#46; El objetivo de este estudio fue identificar la presencia de 3 alteraciones gen&#233;ticas que se pueden tratar mediante los inhibidores terap&#233;uticos espec&#237;ficos de <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> y <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#44; en muestras obtenidas mediante PATB guiada por USEB&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Entre julio de 2014 y junio de 2015 llevamos a cabo un estudio prospectivo y descriptivo de muestras de PATB guiada por USEB de un centro de referencia de Chile&#46; Todos los pacientes firmaron el documento de consentimiento&#44; y el comit&#233; de &#233;tica de nuestro centro aprob&#243; el protocolo&#46; Los criterios de inclusi&#243;n fueron los siguientes&#58; a&#41;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>paciente adulto &#40;&#62;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>a&#241;os&#41; con lesi&#243;n compatible con c&#225;ncer de pulm&#243;n en los estudios cl&#237;nicos y radiol&#243;gicos y sometido a PATB guiada por USEB &#40;EBUS Olympus<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> y EBUS Fuji<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#41;&#44; y b&#41;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>c&#225;ncer de pulm&#243;n confirmado mediante examen anatomopatol&#243;gico &#40;adenocarcinoma o c&#225;ncer no especificado&#41;&#46; Si la TAC hab&#237;a mostrado adenopat&#237;as de m&#225;s de 10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm&#44; lesiones pulmonares perif&#233;ricas de 30<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm o m&#225;s o cualquier lesi&#243;n pulmonar central&#44; se practic&#243; una USEB mediast&#237;nica al paciente&#46; En el momento de practicar la USEB no se dispon&#237;a de ex&#225;menes PET de todos los pacientes&#46; No se excluy&#243; a los pacientes con enfermedad diseminada &#40;USEB practicada con finalidades diagn&#243;sticas&#41;&#44; pero s&#237; a los menores de 18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>a&#241;os y a los que no otorgaron su consentimiento para someterse al procedimiento&#46; Durante la PATB guiada por USEB se obtuvo un m&#237;nimo de 4 muestras&#46; Con las muestras citol&#243;gicas se prepararon bloques celulares y se fijaron con una soluci&#243;n de formol al 10&#37;&#46; Todas las muestras se cubrieron con una soluci&#243;n de parafina y se ti&#241;eron con hematoxilina-eosina&#46; En los casos en los que la morfolog&#237;a de adenocarcinoma o de carcinoma escamoso no era clara&#44; se practicaron tinciones inmunohistoqu&#237;micas&#44; como TTF-1&#47;napsina-A&#44; CK 5&#47;6 o p40&#46; Se efectuaron pruebas moleculares secuenciales de la mutaci&#243;n en el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en las muestras mediante las t&#233;cnicas de secuenciaci&#243;n Sanger &#40;si el recuento de c&#233;lulas tumorales era superior a un 30&#37;&#41; o Cobas<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4800 &#40;una t&#233;cnica automatizada m&#225;s cara&#44; que requiere menos ADN tumoral y ofrece resultados m&#225;s r&#225;pidos&#41;&#44; dependiendo del volumen de la muestra&#46; En los casos de negatividad de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> se analiz&#243; la presencia de la translocaci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> mediante hibridaci&#243;n fluorescente <span class="elsevierStyleItalic">in situ</span> &#40;FISH&#41; &#40;ZytoLight<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> SPEC ALK&#47;EML4 TriCheck&#8482; Probe&#41;&#46; Finalmente&#44; para la detecci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span> se efectu&#243; una tercera prueba molecular mediante FISH &#40;ZytoLight<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> SPEC ROS1 Dual Color Break Apart Probe&#41;&#46; El objetivo principal fue determinar si las muestras de tejido obtenidas a partir de la USEB eran suficientes para realizar an&#225;lisis molecular&#46; Definimos la suficiencia de la muestra como la m&#237;nima concentraci&#243;n de tumor obtenida mediante PATB guiada por USEB con la que es posible procesar una mutaci&#243;n &#40;porcentaje m&#237;nimo del alelo mutado de un 25&#37; por el m&#233;todo Sanger&#41;&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el estudio participaron 86 pacientes y se practicaron 216 PATB guiadas por USEB&#46; Cuarenta y siete &#40;54&#44;65&#37;&#41; de los 86 participantes eran mujeres&#44; y la edad media de los pacientes fue de 65&#44;70<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>a&#241;os &#40;rango 37-91&#41; y no hubo ninguna complicaci&#243;n&#46; Se obtuvieron muestras de adenopat&#237;as de 60&#47;86 &#40;69&#44;76&#37;&#41; pacientes y muestras de par&#233;nquima pulmonar de 26&#47;86 &#40;30&#44;24&#37;&#41;&#46; La cantidad de tejido fue suficiente en el 97&#44;67&#37; &#40;84&#47;86&#41; de las muestras para el an&#225;lisis de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span>&#44; en un 94&#44;23&#37; &#40;49&#47;52 muestras&#41; para el an&#225;lisis de la translocaci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> y en un 83&#44;33&#37; &#40;10&#47;12 muestras&#41; para el an&#225;lisis de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las pruebas moleculares fueron positivas en el 30&#44;23&#37; de los casos &#40;26&#47;86 muestras&#41;&#44; siendo la mutaci&#243;n m&#225;s frecuente la del <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span>&#44; presente en 22&#47;86 &#40;25&#44;58&#37;&#41;&#44; seguida de la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#44; que se observ&#243; en 1&#47;12 casos &#40;8&#44;3&#37;&#41; y la mutaci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span>&#44; observada en 3&#47;52 casos &#40;5&#44;76&#37;&#41;&#46; En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a> se presenta un resumen de los resultados&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El perfil gen&#233;tico del <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> mostr&#243; que la mutaci&#243;n m&#225;s frecuente era una deleci&#243;n en el ex&#243;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>19 &#40;13 casos de delE746-A750 y 2 de del2235-2249&#41;&#44; seguida de la sustituci&#243;n del amino&#225;cido L858R en el ex&#243;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>21 &#40;4 casos&#41; y la sustituci&#243;n del amino&#225;cido G719A en la posici&#243;n 719 del ex&#243;n 18 &#40;2 casos&#41;&#46; Finalmente&#44; en un paciente se identific&#243; una mutaci&#243;n de resistencia adquirida a los inhibidores de la tirosina cinasa &#40;ITC&#41; T790M en el ex&#243;n 20&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este estudio es el primero que ha evaluado la eficacia de la PATB guiada por USEB en el c&#225;ncer de pulm&#243;n y las pruebas de mutaci&#243;n en Sudam&#233;rica&#46; Los resultados previos se hab&#237;an obtenido de muestras posquir&#250;rgicas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La PATB guiada por USEB es un m&#233;todo seguro y de alto rendimiento diagn&#243;stico en el c&#225;ncer de pulm&#243;n&#46; En un ensayo controlado aleatorizado se compar&#243; la estadificaci&#243;n mediast&#237;nica mediante este m&#233;todo con el procedimiento habitual&#44; que consiste en estudios de imagen y biopsia quir&#250;rgica&#46; El tiempo hasta la &#171;confirmaci&#243;n&#187; del diagn&#243;stico fue de 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>semanas con el nuevo abordaje&#44; frente a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>semanas con el procedimiento habitual<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; Asimismo&#44; el n&#250;mero de complicaciones fue inferior y el an&#225;lisis econ&#243;mico m&#225;s favorable en el grupo sometido a PATB guiada por USEB&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Varios estudios han evaluado la eficacia de este m&#233;todo diagn&#243;stico en los an&#225;lisis moleculares del c&#225;ncer de pulm&#243;n&#46; En un estudio multic&#233;ntrico en el que participaron 774 pacientes fue posible analizar el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en un 90&#37; de los pacientes examinados<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a>&#44; lo que concuerda con la prevalencia descrita en nuestra serie&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En otro estudio reciente llevado a cabo por Casadio et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> se practicaron PATB guiadas por USEB a 306 pacientes consecutivos con c&#225;ncer de pulm&#243;n en estadios TNM<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>IIIB-IV&#46; Se analiz&#243; el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en 195 pacientes&#44; obteni&#233;ndose el diagn&#243;stico citol&#243;gico en el 95&#44;1&#37; de los casos&#46; Se observ&#243; mutaci&#243;n en el <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en un 16&#44;9&#37;&#44; en <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> en un 3&#44;9&#37; y en <span class="elsevierStyleItalic">KRAS</span> en un 31&#44;6&#37;&#46; Adem&#225;s&#44; para comparar los porcentajes de mutaciones con una serie quir&#250;rgica hist&#243;rica&#44; se efectu&#243; una prueba de la chi-cuadrado&#44; sin que se observaran diferencias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#44; lo que concuerda con la prevalencia descrita en nuestra serie&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El perfil gen&#233;tico fue similar a los que se han comunicado en otros pa&#237;ses de Sudam&#233;rica&#46; De Melo et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> analizaron los perfiles de mutaciones de 125 pacientes con adenocarcinoma pulmonar y observaron mutaciones en <span class="elsevierStyleItalic">EGFR</span> en un 21&#44;6&#37;&#44; en <span class="elsevierStyleItalic">ALK</span> en un 4&#44;8&#37; y en <span class="elsevierStyleItalic">KRAS</span> en un 26&#44;4&#37; de los casos&#46; Nuestro estudio es uno de los pocos que han mostrado la utilidad de la PATB guiada por USEB para identificar la mutaci&#243;n en <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span> y la mutaci&#243;n de resistencia a ITC&#46;</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El estudio tuvo algunas limitaciones&#44; puesto que no comparamos los resultados negativos de la USEB con los resultados de la cirug&#237;a o la respuesta al tratamiento molecular&#46; En nuestro centro&#44; cada a&#241;o practicamos una media de 220 procedimientos de PATB guiada por USEB&#44; y diagnosticamos adenocarcinoma pulmonar en aproximadamente un 70&#37; de los casos&#46; Al ser un centro de referencia regional para la pr&#225;ctica de esta t&#233;cnica no realizamos el seguimiento de algunos pacientes&#44; y se completa el procesamiento de las muestras en el centro que los deriv&#243;&#44; y este es el motivo del bajo n&#250;mero de pacientes a los que practicamos an&#225;lisis de mutaci&#243;n&#46; Debido a que efectuamos pocas pruebas de <span class="elsevierStyleItalic">ROS1</span>&#44; es necesario realizar un estudio con m&#225;s casos que permita un an&#225;lisis m&#225;s completo&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para concluir&#44; la PATB guiada por USEB es una t&#233;cnica m&#237;nimamente invasiva &#250;til para la obtenci&#243;n de muestras citopatol&#243;gicas destinadas al an&#225;lisis de mutaciones moleculares en pacientes con c&#225;ncer de pulm&#243;n&#46; Estas muestras tambi&#233;n se pueden utilizar para evaluar mutaciones de resistencia adquirida&#46;</p></span>"
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">EGFR&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">ALK&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">ROS1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Muestras totales&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">86&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">52&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">12&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Muestras suficientes&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">84 &#40;97&#44;67&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">49 &#40;94&#44;23&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">10 &#40;83&#44;33&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Pruebas positivas&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">22&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Porcentaje de pruebas positivas&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">25&#44;58&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">5&#44;8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">8&#44;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></tbody></table>
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Article information
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DOI:10.1016/j.arbres.2016.08.013
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